چکیده مقاله
با استفاده از ایمونوگلبولینها میتوان اطلاعات دقیقی در مورد یک آنتیژن خاص بدست آورد برای جداسازی اختصاصی یک کلاس ایمونو گلبولین از روش کروماتوگرافی جذبی استفاده میشود هدف از این مطالعه کلون و بیان پروتئین G نوترکیب باکتری استرپتوکوکوس است که در کروماتوگرافی جذبی برای جداسازی IgG سرم استفاده می گردد در این مطالعه پس از دریافت پروتئین G در وکتور بیانی pET ۲۸a ، تایید حضور ژن G در وکتور بیانی مذکور توسط تکنیک PCR انجام شد پس از انجام تست تاییدی ابتدا در یک سویه کلونینگ TOP۱۰ به منظور تکثیر منتقل گردید و پس از استخراج پلاسمید در یک سویه بیانی BL۲۱ کلون گردید ژن پروتئین G خالص سازی شد و به کمک پرایمرهایی که بر اساس ژن پروتئین G طراحی شده بودند واکنش PCR انجام شد برای جدا کردن ژن فوق پلاسمید نوترکیب با آنزیم های xho I و EcoR I هضم گردید جهت بررسی اندازه پروتئین نوترکیب روی ۱۲% SDSpage بارگذاری شد و ارزیابی تیتر آنتی بادی تولید شده توسط تکنیک الایزا و تزریق به حیوان آزمایشگاهی موش ایمن شده جهت تولید آنتی بادی و تشخیص عفونت های موجود در خون مورد بررسی قرار گرفت محصول PCR که دارای ۷۰۵ جفت نوکلئوتید میباشد با موفقیت در پلاسمید بیانی کلون و تایید شد پروتئین با روش کروماتوگرافی نیکل تخلیص و با وسترن بلات ارزیابی شد حضور باند ۲۹/۹۱ کیلودالتونی در ژل ۱۲% SDSpage ، بیان پروتئین نوترکیب و هم چنین حضور باند بر کاغذ نیتروسلولز در محدوده مذکور در آزمون وسترن بلاتینگ، تاییدی بر تولید پروتئین نوترکیب بود، میزان پروتئین تخلیص شده در این تحقیق ۷۸ میکروگرم در میلی لیتر بود بر اساس آزمایش الایزاپروتئین G به خوبی قادر به شناسایی IgG موش بود و تفاوت معنا داری در نمونه گیری نوبت اول و نوبت دوم در تیتراسیون IgG گروه تزریقی پروتئین Fc RBD وجود نداشت نتایج نشان دادند با تولید و طراحی آنتی بادی های مهندسی شده علیه IgG میتوان به راحتی عفونتهای موجود در خون موش در آزمایشگاه های ایمنی شناسی را شناسایی کرد
کلیدواژه‌ها
نویسندگان
زهرا رنجبر تنگ کرمی
دانش آموخته گروه ژنتیک، دانشکده علوم زیستی، واحد ورامین پیشوا، دانشگاه آزاد اسلامی، ورامین، ایران
شهره زارع کاریزی
گروه ژنتیک و بیوتکنولوژی، دانشکده علوم زیستی، واحد ورامین پیشوا، دانشگاه آزاد اسلامی، ورامین، ایران
شیوه ارجاع
�نجبر تنگ کرمی، زهرا و زارع کاریزی، شهره،1402،طراحی و تولید آنتی بادی مهندسی شده برعلیه IgG جهت تشخیص عفونتهای موجود در خون،هفتمین همایش بین المللی مطالعات میان رشته ای در صنایع غذایی و علوم تغذیه ایران،تهران
ارائه‌شده در
مجموعه مقالات هفتمین همایش بین المللی مطالعات میان رشته ای در صنایع غذایی و علوم تغذیه ایران30 آبان 1402 · تهران